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细菌总蛋白变性提取试剂
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细菌总蛋白变性提取试剂

 详情说明

​细菌总蛋白变性提取试剂

货号:ZK-PL3512

描述:

细菌蛋白提取试剂Ⅱ(变性)采用离子型去污剂,用于提取细菌中总蛋白,适用于后续的Western Blot等免疫实验。


适用范围:

从新鲜或者冻存的细菌中提取蛋白。


规格:

25ml 100mL


储存:

室温保存 12个月有效


提取方法:

1. 将细菌培养物在预先称重的离心管中4ºC,5000g离心15分钟,收集菌体;

2. 去上清,称量菌体重量,按照每克菌体加入10-50ml细菌蛋白抽提试剂Ⅱ(变性),涡旋震荡使菌体完全重悬;

3. 室温孵育15-20分钟(孵育时间可根据细胞类型的不同做调整)。

4. 15000g,离心10分钟;

5. 将上清转移至新的离心管中,即得到总蛋白,可应用BCA法进行蛋白定量及后续实验。


注意:

1. 该提取试剂中不含有蛋白酶抑制剂,用户可根据具体情况添加蛋白酶抑制剂、还原剂、螯合剂等。

2. 当提取物粘度较高或提取的蛋白以包涵体形式存在时,建议在加入溶菌酶和DNaseⅠ.

3. 如果在提取纯化过表达蛋白的过程中,得到的部分蛋白可能在沉淀中,那么目的蛋白可能以包涵体的形式存在,可使用包涵体蛋白溶解液进行溶液,也可以优化蛋白表达条件,增加可溶性蛋白的表达。


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