​Western及IP裂解液

货号：ZK-PL3486

规格：100ml  500ml

描述：

IP裂解缓冲液，为您提供完整的组织、细胞总蛋白制备方案。

IP裂解缓冲液(C1054)能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合能力或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉

规格：

100ml   500ml

制备细胞裂解产物：

1. 800g4℃离心5分钟收集培养细胞，而后用预冷的PBS洗涤细胞两次。估计细胞离心后的体积（PCV,106cells=~20ul,107cells =~100ulPCV）；

2. 每50～100mlPCV加入5倍体积IP裂解缓冲液（250~500ml）,涡旋震荡10秒，冰浴放置20分钟；

3. 12000g4℃离心15分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物，

制备组织裂解产物：

1. 取50-100mg组织在冰上剪成碎片，用预冷的PBS洗涤2次离心弃去PBS；

2. 加入0.5-1ml预冷的IP裂解缓冲液；

3. 4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40次，直到95％的细胞被破碎，涡旋震荡10秒，冰浴放置20分钟；

4. 12000g4℃离心15分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物，可用于后续的免疫沉淀或者Western Blot等实验。

注意：

1. 在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物；

2. 在做免疫沉淀或免疫共沉淀时最好在实验前进行蛋白的提取，以避免某些不稳定蛋白的降解；

3. 在该裂解缓冲液中未加入蛋白酶抑制剂，用户可自行选择进行添加。