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人乙型脑炎病毒IgM抗体(JEV-IgM)ELISA检测试剂盒
人乙型脑炎病毒IgM抗体(JEV-IgM)ELISA检测试剂盒
人乙型脑炎病毒IgM抗体(JEV-IgM)ELISA检测试剂盒

人乙型脑炎病毒IgM抗体(JEV-IgM)ELISA检测试剂盒

 详情说明

​人乙型脑炎病毒IgM抗体(JEV-IgM)ELISA检测试剂盒

货号:ZK-H4120

品牌:9游总区生物ZIKER;
检测方法:酶联免疫分析检测法;
规格:48T/96T;
包装:盒;
有效期:6个月;
保存温度: 2-8℃;
应用范围:仅供科研研究实验使用,不可用于临床诊断使用;
可检测样品形式:血清/血浆/组织匀浆/细胞培养上清/相关生物液体。


样品收集、处理及保存方法
1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱

操作注意事项
1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.  预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。
4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条
阴性对照 0.5mL 0.5mL
阳性对照 0.5mL 0.5mL
检测抗体-HRP 10mL 5mL
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL
底物B 6mL 3mL
终止液 6mL 3mL
封板膜 2张 2张
说明书 1份 1份
自封袋 1个 1个

试剂的准备
 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法
1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;
3.  待测样本孔加待测样本50μL;
4.  随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断
 1.  试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;
                阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2.  临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3.  阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性
4.  阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性

试剂盒性能
1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。
2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
5. 有效期:6个月
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