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尿素氮(BUN)含量测定试剂盒(二乙酰肟显色法)
货号:ZK-PL4011
规格:100-300次
描述:尿素是体内蛋白质分解代谢的含氮终产物,构成了血液中绝大部分的非蛋白氮。尿素产生于肝脏, 经肾脏排泄至尿中,其含量取决于蛋白质摄入量,蛋白质分解代谢和肾功能。血清(浆)中尿素测定是临床中反映肾小球滤过功能的常用指标。试剂盒采用二乙酰肟显色法,操作简单,特异性强,重复性佳,线性范围 0.03-14mmol/L。
原理: 根据 Fearon 反应,在强酸性和加热条件下,尿素与二乙酰一肟缩合生成红色的二嗪衍生物,在540nm处有最大吸收峰,光密度值在一定范围内与尿素含量成正比。
适用:血清、血浆 、尿液
组成:(微孔测定 300 个样本,1cm 比色杯 100 个样本)
R1 试剂 50ml
R2 试剂 5ml
16mM 尿素标准品 0.5ml
以上组分 4℃保存, 12 个月有效
所需设备:酶标仪、721、722 型可见光分光光度计。最佳工作波长 540nm,如无此波长建议选用 520nm。
操作步骤:
一、工作液配制:将 R1 试剂与 R2 试剂按 10:1 的比例混合均匀,现配现用。
二、标准品稀释:将 16mM 标准品用蒸馏水倍比稀释为 8、4、2、1、0.5、0.25、0.125mM 通常取 8、4、2、1、0.5mM 五个点即可,注意设置 0 浓度空白对照。
三、尿素浓度测定
(1) 参照下表加样,充分混匀(可按比例调整整体上样量)。
尿液样本建议稀释 1:10—1:50 倍,若超出线性范围,需再稀释。
酶标板测定加样比例 | 1 ml 比色杯测定的加样比例 | |||||
空白管 | 标准品 | 样本管 | 空白管 | 标准品 | 样本管 | |
蒸馏水 µl | 3 | 10 | ||||
标准品 µl | 3 | 10 | ||||
样品 µl | 3 | 10 | ||||
工作液 µl | 165 | 165 | 165 | 550 | 550 | 550 |
(2) 请使用耐高温管于 100°C 沸水浴或金属浴中孵育 15min。立即冷水冷却 5min。反应平衡后,30min内颜色稳定。
(3) 使用酶标仪或可见光分光光度计,540nm 空白管调零后,进行测定。
(4) 以 OD 值为 y 轴,尿素浓度为 x 绘制标准曲线并计算尿素浓度。
说明:
(1) 目前实验研究中,已基本采用直接测定尿素浓度反应肾脏滤过功能,试剂盒测定的数值即为尿素浓度,单位为mmol/L。
(2) 正常血清尿素浓度参考值 2.86~8.20 mmol/L。
(3) 尿素氮是指尿素分子氨基中的N 含量(blood urea nitrogen, BUN),检测结果多用 mg/dl 为单位,尿素和尿素氮换算公式:
尿素 mg/dl*0.1665=尿素 mmol/L
尿素 mg/dL *(28.02/60.60)=BUN mg/dL
(4) 试剂盒仅限于科研,操作时请佩戴手套。
0755-28715175/33164177