/

全国统一客服热线:
0755-28715175

产品中心
Product
4产品中心
线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒
线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒
线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒

线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒

 详情说明

​线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒

货号:ZK-PL3522

规格:50次 100次

描述:线粒体和胞浆蛋白制备试剂盒 (Mitochondria Isolation Kit)用于从组织或培养细胞中分离线粒体和细胞胞浆成分。加入分离溶液,匀浆破碎组织细胞,经过数次800g和12000g离心,在60分钟内即可分离出完整的线粒体和胞浆成分。制备的线粒体具有很高的生物学活性,可进行各种功能研究如酶学测定,更可用于Western Blot,2D-胶、线粒体蛋白或DNA提取、蛋白质组学等研究。严格按照说明操作,总是能制备获得高纯度线粒体。一篇方法学研究论文发现,用普利莱试剂盒制备线粒体的得率、活性、纯度优于蔗糖密度梯度离心法和Invotrogen/Pierce线粒体提取试剂盒方法。

特点:

1、 操作简单,可在一小时内完成。

2、 实验室常规设备即可,无需超速离心。

3、 制备的线粒体具有高活性,可用于后续的各类实验分析。


规格:

50次 100次


储存:

−20°C 一年有效


操作步骤:(注意:以下所有操作均在4°C进行)

1. 样品处理:组织匀浆:取100~200mg新鲜组织样品,剪为0.5cm2的碎块放入玻璃匀浆器内。加入1.5mL冰预冷的MitoSolution。研磨组织20次。培养细胞匀浆:800g5min离心收集细胞。单次提取需2-5×107个细胞。加入1.5 mL冰预冷MitoSolution重悬细胞,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内研磨细胞30次。

2. 将匀浆液转移到离心管中,800g,4ºC离心5min。

3. 取上清液。再次800g,4ºC 离心5min。

4. 将上清液转移到新的离心管。10,000g,4ºC离心10min。线粒体沉淀在管底。离心后的上清含胞浆成分,可收集用于对照实验。

5. 洗涤线粒体:加入0.2mLMitoSolution,轻弹管底重悬线粒体沉淀;12,000g,4ºC离心10min弃上清,线粒体沉淀在管底。

6. 重悬线粒体:可以用MitoSolution重悬线粒体沉淀,也可以用合适后续实验的自备缓冲液来裂解线粒体沉淀,具体用量是:约每100mg组织提取的线粒体用50µl,约每5×107个细胞提取的线粒体用100µl.用量请根据组织或细胞类型进行微调。

7. 裂解线粒体后,进行蛋白浓度测定。立即使用或−70ºC保存。


Copyright © 深圳9游总区生物科技有限公司版权所有

扫一扫,加关注

客户服务热线:
0755-33164177
13924667705
18665335907
0755-28715175


线