中文名称:ECL超敏发光液/ECL超敏发光底物
英文名称:ECL Western Blotting Substrate
规格价格:
25ml 100ml
保存条件:Store at 2-8 °C for one year.
产品介绍:
ECL Plus 超敏发光液直接或间接检测与辣根过氧化物酶HRP 关联的蛋白或核酸底物。这一独特的发光底物系统是目前最灵敏的商业化荧光ECL检测试剂,具有极高灵敏度和高信噪比,可检测出10-100 fg的微量抗原;发光迅速,荧光可使X 感光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白或核酸检测。同时该试剂允许使用更高的抗体稀释倍数(1:2000-1:10000),极其节省抗体。
试剂盒内容:
25ml规格:A液12.5ml + B液12.5ml
100ml规格:A液50ml + B液50ml
保存方法: 2-8 ºC避光保存,一年有效。
显色步骤
1、执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot封闭、一抗孵育、二抗孵育操作。
2、二抗适用HRP标记二抗,适用恰当的稀释比例。
3、制备ECL工作液:A液和B液等体积的混合,例如1ml A液和1ml B液混合,混匀后即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准,每10 cm2膜需要大约1 ml工作液。
4、将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上,加上配好的发光底物工作液。
5、将将工作液均匀滴加在印迹膜上,孵育1-5min。可将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上,轻轻赶出其间的气泡。
6、在暗室中取一张X胶片小心置于膜上,曝光5秒至1分钟,立即显影定影。
7、根据其发光的强度,缩短或延长X片的曝光时间(对微弱信号,曝光时间可延长至数小时),或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。
安全性:
无特殊毒性,按普通化学品处理。如果不慎与眼、皮肤和衣物接触,请立刻用大量清水冲洗。