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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

货号:ZKP092

规格:40-60块

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

 详情说明

SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

英文名称:SDS-PAGE kit
规格:40-60块

产品简介:
SDS-PAGE凝胶制备试剂盒规格:可制40-60块凝胶
本公司生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Parparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶了。SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶,也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶。
本试剂盒可配制不同常规、不同聚合度的PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶) 约40-60块。

包装清单

30%丙烯酰胺混合液 100ml
1.5mol/L Tris(pH8.8)
100ml
1.0mol/L Tris(pH6.8)
30ml
10%过硫酸铵
5ml
10% SDS
5ml
TEMED
0.5ml
说明书
一份

保存条件
保存: 10% SDS和TEMED (避光) 室温保存。30%丙烯酰胺混合液、1.5mol/L Tris(pH8.8)、1.0mol/L Tris(pH6.8)4°C保存、过硫酸铵配制成10%溶液后,分装成小管-20°C保存,通常半年内有效。

使用说明:
1. 10%过硫酸铵为5ml,应分装置-20°C保存,通常半年内有效。
2. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度
最佳分离范围
6%胶
57-212kD
8%胶
36-94kD
10%胶
20-80kD
12%胶
12-60kD
15%胶
10-43kD

配制6%的PAGE分离胶
成分
所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积
5 10 15
20
25
30
蒸馏水
2.6
5.3
7.9
10.6
13.2
15.9
30%丙烯酰胺混合液
1.0
2.0
3.0
4.0
5
6.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5.0
6.3
7.5
10%SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
TEMED
0.004
0.008
0.012
0.016
0.02
0.024

配制8%的PAGE分离胶
成分
所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积
5
10
15
20
25
30
蒸馏水
2.3
4.6
6.9 9.3
11.5
13.9
30%丙烯酰胺混合液
1.3
2.7
4.0
5.3
6.7
8.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5.0
6.3
7.5
10%SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
TEMED
0.003
0.006
0.009
0.012
0.015
0.018

配制10%的PAGE分离胶
成分
所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积
5
10
15 20
25
30
蒸馏水
1.9
4.0
5.9 7.9
9.9
11.9
30%丙烯酰胺混合液
1.7
3.3
5.0
6.7
8.3
10.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5.0
6.3
7.5
10%SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.01
0.012

配制12%的PAGE分离胶
成分
所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积
5
10
15
20 25
30
蒸馏水
1.6 3.3
4.9
6.6
8.2
9.9
30%丙烯酰胺混合液
2.0
4.0
6.0
8.0
10.0
12.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5.0
6.3
7.5
10%SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.01
0.012

配制15%的PAGE分离胶
成分
所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积
5
10
15
20
25
30
蒸馏水
1.1
2.3 3.4 4.6
5.7
6.9
30%丙烯酰胺混合液
2.5
5.0
7.5
10.0
12.5
15.0
1.5mol/L Tris(pH8.8)
1.3
2.5
3.8
5.0
6.3
7.5
10%SDS
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
10%过硫酸铵
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
TEMED
0.002
0.004
0.006
0.008
0.001
0.012

3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)

配制不同体积的浓缩胶
成分
所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积
2
3
4
5
6
8
蒸馏水
1.4
2.1
2.7
3.4
4.1
5.5
30%丙烯酰胺混合液
0.33
0.5
0.67
0.83
1.0
1.3
1.0mol/L Tris(pH6.8)
0.25
0.38
0.5
0.63
0.75
1.0
10%SDS
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.08
10%过硫酸铵
0.02
0.03
0.04
0.05
0.06
0.08
TEMED
0.002
0.003
0.004
0.005
0.006
0.008

注意事项 
10%过硫酸铵的水溶液不稳定,每次取用后应立即放回冰箱,尽量减少室温存放时间,以防失效。如发现凝胶聚合不好,应考虑丢弃使用过的10%过硫酸铵,更换新配制的10%过硫酸铵。
另外PAGE凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切,在其它条件不变的情况下,可通过改变TEMED的用量,控制PAGE凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。操作中,特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
未聚合的丙烯酰胺有毒,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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