测定意义：

辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD是糖酵解和TCA循环的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态，NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD降解产物具有非常重要的调控作用。

测定原理：

NAD和NADH在254 nm下有吸收峰，利用高效液相色谱法在相应波长下测定其含量。

需自备的仪器和用品：
高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系和有机系各2个，0.45μm）、C18柱（4.6 ×150 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2mL）、乙腈（120 mL）、甲醇（色谱级，300 mL）、蒸馏水